此外，研究發(fā)現(xiàn)肽N－糖基化酶（PNGase）F－處理（N－去糖基化）的初級T細(xì)胞、CD45＋Jurkat細(xì)胞以及異位表達(dá)CD45RA和CD45RO的CD45－Jurkat細(xì)胞均顯示與BTN3A1 Fc蛋白的結(jié)合顯著降低，而CD45的表面表達(dá)保持完整。使用N－聚糖抑制劑衣霉素也獲得了類似的結(jié)果，這些結(jié)果都表明了BTN3A1與CD45結(jié)合的N－糖基化依賴的機(jī)制。

抗BTN3A1誘導(dǎo)協(xié)同T細(xì)胞反應(yīng)在體內(nèi)抑制了卵巢腫瘤生長

為了評估利用CTX－2026靶向BTN3A1的潛力，試驗(yàn)人員進(jìn)行了小鼠的體內(nèi)試驗(yàn)。與對照相比，用CTX－2026抗體阻斷BTN3A1可延緩9個(gè)不同供體腫瘤的惡性進(jìn)展（在10個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)中），并且比唑來膦酸鹽更有效。與對照IgG治療小鼠相比，CTX－2026誘導(dǎo)的優(yōu)越治療效果與腫瘤內(nèi)抗原反應(yīng)性CD8＋T細(xì)胞的積聚顯著增加有關(guān)。當(dāng)與腫瘤反應(yīng)性T細(xì)胞結(jié)合時(shí)，CTX－2026比抗PD－1抗體nivolumab更有效，盡管體內(nèi)NY－OVCAR3腫瘤細(xì)胞上調(diào)PD－L1。值得注意的是，所有實(shí)驗(yàn)中的腫瘤允許生長至少15天，并通過單次T細(xì)胞注射進(jìn)行治療，在過繼轉(zhuǎn)移時(shí)，大至300 mm3的腫瘤具有顯著的生長延遲。

值得注意的是，CTX－2026在體內(nèi)的保護(hù)作用并不局限于腫瘤反應(yīng)性αβ－T細(xì)胞，因?yàn)閬碜?個(gè)不同供體的γδ－T細(xì)胞與CTX－2026抗體結(jié)合使用也能誘導(dǎo)腫瘤生長減緩。相應(yīng)地，BTN3A1靶向?qū)е履[瘤床內(nèi)Vγ9－T細(xì)胞大量積聚。然而，只有將γδ和腫瘤特異性αβ－T細(xì)胞聯(lián)合給與NY－OVCAR3荷瘤NSG小鼠中，并結(jié)合CTX－2026，才能實(shí)現(xiàn)對既定腫瘤的最大抗腫瘤響應(yīng)，并且優(yōu)于唑來膦酸鹽治療。這種治療引起腫瘤內(nèi)囊腔的形成，表明腫瘤部分排斥反應(yīng)。因此，以BTN3A1為靶點(diǎn)，協(xié)調(diào)從BTN3A1介導(dǎo)的免疫抑制中恢復(fù)的腫瘤反應(yīng)性αβ－T細(xì)胞和細(xì)胞毒性Vγ9Vδ2 T細(xì)胞，使這些T細(xì)胞被重定向以殺死BTN3A1＋腫瘤。

此外，研究人員在BTN3A1KI 小鼠腹腔注射構(gòu)建了原位ID8－Defb29／Vegf－a腫瘤模型（一種對檢查點(diǎn)抑制劑有反應(yīng)并引起促腫瘤的CD11c＋髓樣細(xì)胞積聚的侵襲性模型）。可以預(yù)見的是，與對照組相比，BTN3A1KI 小鼠在腹水中積聚了BTN3A1＋樹突狀細(xì)胞，并且顯示出加速的惡性進(jìn)展。用唑來膦酸鹽治療攜帶腫瘤的BTN3A1KI 小鼠延長了生存期，但其程度低于CTX－2026抗體的治療，腫瘤內(nèi)CD8＋T細(xì)胞積聚也存在相應(yīng)差異。因此，在IFN－γ酶聯(lián)免疫吸附斑點(diǎn)（ELISpot）分析中，腹膜T細(xì)胞對同源腫瘤抗原的反應(yīng)頻率因所有BTN3A1靶向療法而增加，CTX－2026的讀數(shù)最高。小鼠γδ－T細(xì)胞以CTX－2026依賴的方式積聚在BTN3A1KI 荷瘤小鼠的腹水中。在另一個(gè)人源化模型中，靶向BTN3A1比中和PD－L1／PD－1檢查點(diǎn)更有效地延緩了腫瘤惡性進(jìn)展。因此，BTN3A1靶向治療克服了卵巢癌高度免疫抑制的微環(huán)境，而卵巢癌是一種迄今為止對現(xiàn)有檢查點(diǎn)抑制劑具有耐藥性的疾病。

小結(jié)

通過以上試驗(yàn)，可以發(fā)現(xiàn)靶向BTN3A1的抗體足以誘導(dǎo)αβ和γδ－T細(xì)胞協(xié)同抗腫瘤反應(yīng)，并且靶向BTN3A1在卵巢癌原位異種移植和同基因模型中優(yōu)于PD－1檢查點(diǎn)的治療。大多數(shù)人類惡性腫瘤對現(xiàn)有的檢查點(diǎn)抑制劑仍然具有抗藥性，這些抑制劑的目的是拯救αβ－T細(xì)胞的反應(yīng)。然而，γδ－T細(xì)胞也滲透到多種人類癌癥中，它們主要起調(diào)節(jié)作用。因此，使這兩個(gè)T細(xì)胞亞群的合作可以擴(kuò)大癌癥患者從免疫治療中受益的范圍。

此外，在PD－L1＋的人源化模型中，BTN3A1靶向比PD－1中和在αβ－T細(xì)胞中更有效，由于γδ－T細(xì)胞也表達(dá)PD－1，因此確定對檢查點(diǎn)抑制劑有反應(yīng)的患者是否也有協(xié)同作用是很有趣的。然而，與PD－L1不同，BTN3A1不需要特定的受體來調(diào)節(jié)其免疫抑制活性。另外，至少在卵巢癌中，BTN3A在髓系和腫瘤細(xì)胞中的過表達(dá)與加速的惡性進(jìn)展有關(guān)；因此，BTN3A1靶向可能與其他檢查點(diǎn)抑制劑結(jié)合以增強(qiáng)免疫治療反應(yīng)。

參考文獻(xiàn)：

BTN3A1 governs antitumor responses by coordinating αβ and γδ T cells． Science． 2020 Aug 21；369（6506）：942－949．